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  1.本发明属于水产饲料技术领域，尤其涉及一种具有抗氧化功效的饲料添加剂及其制备方法与应用。

  2.近年来，随着我们国家水产养殖业的迅猛发展，我国水产养殖已取得了巨大了的成就。但与此同时，高密度、集约化养殖模式的出现和发展，导致养殖环境恶化，水产动物相关疾病容易暴发和流行，养殖过程中死亡率居高不下，因此提高水产动物抗氧化性能是降低疾病发生率和保证养殖动物快速生长的关键。虽然现有能提高水产动物清除自由基能力、增强免疫力和生长速率的饲料添加剂组分繁多，但寻求抗氧化和增强免疫力性能更为优异的饲料添加剂仍是当今研究和开发的热点和重点。

  3.小球藻(chlore lla sorokiniana)是一种单细胞绿藻，其细胞呈球形或椭球形，直径在2-12μm之间，常见种类包括普通小球藻(c.vulgaris)、椭圆小球藻(c.ellipsoidea)、原壳小球藻(c.protothecoides)和蛋白核小球藻(c.pyrenoidosa)等。小球藻富有丰富的油脂、蛋白质、多糖、氨基酸、维生素和矿物质，现有研究表明小球藻具有一定的免疫调节作用、抗氧化作用和解毒保肝作用，通常以小球藻粉或小球藻渣的形式被被应用于部分畜禽和水产动物的养殖饲料中，但尚未有将小球藻与其他组分联用以提高抗氧化性能的先例。因而，本发明对此展开研究，以期获得一种包含小球藻且性能更佳的饲料添加剂产品。

  4.本发明旨在至少解决上述现存技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出一种具有抗氧化功效的饲料添加剂及其制备方法与应用，该饲料添加剂可有效提升水产动物的免疫力和抗氧化能力，从而促进和保证水产动物的良好快速生长。

  5.本发明提供一种饲料添加剂，包括以下组分：小球藻醇提物、甲壳胺、肉桂醛和乳酸甘油酯。

  6.在上述组分中，甲壳胺通常被用作缓释成分并具有促进吸收的作用；肉桂醛可有助于促进动物体的生长，但由于肉桂醛容易氧化的特性限制了其应用；而乳酸甘油酯则是一种较为理想的饲用抗生素替代品，起到抗菌的作用，并具有安全性高、无耐药性的优点。本发明发现，将甲壳胺、肉桂醛和乳酸甘油酯与具有抗氧化功效的小球藻醇提物组合后，所制得产品的抗氧化性能相比于小球藻醇提物得到非常明显提高，具有作为水产动物饲料添加剂的突出潜力。

  7.优选的，所述饲料添加剂包括以下重量份数的组分：小球藻醇提物35-50份、甲壳胺5-8份、肉桂醛4-10份、乳酸甘油酯2-5份。

  8.优选的，所述乳酸甘油酯包括单乳酸甘油酯、二乳酸甘油酯、三乳酸甘油酯中的至少一种。

  9.优选的，所述小球藻醇提物是以小球藻粉为原料，经氯仿-甲醇浸提法所制得。与别的类型的索氏提取法和溶剂提取法相比，本发明采用氯仿-甲醇浸提法对小球藻中成分进行提取，具有提取率高和操作步骤较为简单的优势，有助于实际大规模生产和应用。

  10.更优选的，所述小球藻醇提物的提取方法为：将小球藻粉分散于氯仿-甲醇混合液中，水浴加热，过滤，去除溶剂，得到小球藻醇提物。

  11.进一步优选的，所述氯仿-甲醇混合液中氯仿与甲醇的体积比为(2-2.5)：1。

  12.进一步优选的，所述小球藻粉与氯仿-甲醇混合液的料液比为1：(6-8)。

  14.将小球藻醇提物、甲壳胺、肉桂醛和乳酸甘油酯进行混合，经粉碎机粉碎，制得所述饲料添加剂。

  15.优选的，所述粉碎的转速为250-400r/min，粉碎的时间为30-50min。

  18.本发明还提供了一种水产饲料，包含0.1-1wt％的上述饲料添加剂。

  20.为增强和提高小球藻成分的抗氧化性能，本发明所述饲料添加剂将小球藻醇提物作为主要抗氧化成分，再通过添加甲壳胺、肉桂醛和乳酸甘油酯与之配合，产生了协同增效作用，大幅度的提升了饲料添加剂的抗氧化功效。将该饲料添加剂用于制备水产饲料，可有效提升水产动物的免疫力和抗氧化能力，从而促进和保证水产动物的良好快速生长。

  21.为了让本领域技术人员更加清楚明白本发明所述技术方案，现列举以下实施例进行说明。需要指出的是，以下实施例仅为本发明的优选实施例，对本发明要求的保护范围不构成限制作用，任何未违背本发明的精神实质和原理下所做出的修改、替代、组合，均包含在本发明的保护范围内。

  22.以下实施例中所用的原料、试剂或装置如无特殊说明，均可从常规商业途径得到，或者能够最终靠现有已知方法得到。

  24.本实施例提供一种饲料添加剂，包括以下重量份的组分：小球藻醇提物35份、甲壳胺5份、肉桂醛4份、单乳酸甘油酯3份。

  25.其中小球藻醇提物的制备方法为：将小球藻粉碎得到小球藻粉，将小球藻粉以1:6的料液比(m/v)加入至氯仿-甲醇混合液(氯仿与甲醇的体积比为2：1)进行分散，水浴加热至氯仿-甲醇混合液轻微沸腾，浸提约6h后，过滤去除小球藻渣，再分离得到溶剂层，采用旋转蒸发仪去除溶剂，得到小球藻醇提物。

  27.按配方称取各组分，将小球藻醇提物、甲壳胺、肉桂醛和单乳酸甘油酯进行混合，经粉碎机粉碎，粉碎的转速为300r/min，粉碎的时间为40min，制得饲料添加剂。

  29.本实施例提供一种饲料添加剂，包括以下重量份的组分：小球藻醇提物50份、甲壳

  30.其中小球藻醇提物的制备方法为：将小球藻粉碎得到小球藻粉，将小球藻粉以1:6的料液比(m/v)加入至氯仿-甲醇混合液(氯仿与甲醇的体积比为2：1)进行分散，水浴加热至氯仿-甲醇混合液轻微沸腾，浸提约6h后，过滤去除小球藻渣，再分离得到溶剂层，采用旋转蒸发仪去除溶剂，得到小球藻醇提物。

  32.按配方称取各组分，将小球藻醇提物、甲壳胺、肉桂醛和二乳酸甘油酯进行混合，经粉碎机粉碎，粉碎的转速为300r/min，粉碎的时间为40min，制得饲料添加剂。

  35.其中小球藻醇提物的制备方法为：将小球藻粉碎得到小球藻粉，将小球藻粉以1:6的料液比(m/v)加入至氯仿-甲醇混合液(氯仿与甲醇的体积比为2：1)进行分散，水浴加热至氯仿-甲醇混合液轻微沸腾，浸提约6h后，过滤去除小球藻渣，再分离得到溶剂层，采用旋转蒸发仪去除溶剂，得到小球藻醇提物。

  37.本对比例提供一种饲料添加剂，包括以下重量份的组分：甲壳胺5份、肉桂醛4份、单乳酸甘油酯3份。

  39.按配方称取各组分，将甲壳胺、肉桂醛和单乳酸甘油酯进行混合，经粉碎机粉碎，粉碎的转速为300r/min，粉碎的时间为40min，制得饲料添加剂。

  42.在普通生鱼饲料(含有以下重量百分数的组分：豆饼25％、鸡肉粉10％、鱼粉25％、麸皮15％、面粉15％、鱼油6％、复合维生素2％，无机盐1％、饲料粘合剂1％)中，分别加入特殊的比例实施例1-2、对比例1-2中所制得的饲料添加剂，制得相应的生鱼饲料，所制得的生鱼饲料分组为：

  43.生鱼饲料1：按重量百分数，包含99.5％的上述普通生鱼饲料和0.5％实施例1所制得的饲料添加剂；

  44.生鱼饲料2：按重量百分数，包含99.5％的上述普通生鱼饲料和0.5％实施例2所制得的饲料添加剂；

  45.生鱼饲料3：按重量百分数，包含99.5％的上述普通生鱼饲料和0.5％对比例1所制得的饲料添加剂；

  46.生鱼饲料4：按重量百分数，包含99.5％的上述普通生鱼饲料和0.5％对比例2所制得的饲料添加剂。

  48.将生鱼作为养殖试验的水产动物种类，分别投喂普通生鱼饲料和上述生鱼饲料1-4，进行养殖试验。采用循环水养殖系统来进行养殖试验，将市面上购买得到的生长状况基本相同的生鱼鱼苗共500尾，随机分成5组，每组100尾鱼，在相同温度、ph等环境条件下进行生长养殖实验，持续30天；投喂方法和养殖条件均为常规方法和条件。养殖试验结束后，每组

  随机挑选10尾活力良好的生鱼，采用南京建成生物工程研究所有限公司、合肥莱尔生物科技有限公司和北京盒子生工科技有限公司的检测试剂盒对各组生鱼血清中的总抗氧化能力(t-aoc)、超氧化物歧化酶(sod)、谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)和丙二醛(mda)的活性或含量进行测定，结果取平均值，测试结果如表1所示。

  从表1可知，与普通生鱼饲料相比，饲喂生鱼饲料4的生鱼其血清的抗氧化指标变化较小，表明甲壳胺、肉桂醛和单乳酸甘油酯虽然具有抗菌和促生长的作用，但不具备显著提升生鱼抗氧化性的作用。而与普通生鱼饲料相比，添加有单一小球藻醇提物的生鱼饲料3可提高所喂养生鱼的抗氧化性能，表明小球藻醇提物本身就具有一定的提高生鱼抗氧化性能的作用。而与生鱼饲料3相比，生鱼饲料1-2所喂养的生鱼中血清抗氧化指标得到进一步提升，该根据结果得出甲壳胺、肉桂醛和单乳酸甘油酯的加入能够有效增强小球藻醇提物的抗氧化功效，来提升水产动物的抗氧化能力和促进良好生长。

  上面对本技术实施例作了详细说明，但是本技术不限于上述实施例，在所属技术领域普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本技术宗旨的前提下作出各种变化。此外，在不冲突的情况下，本技术的实施例及实施例中的特征可以相互组合。